Гематоксилин Майера, Эрлиха, Гарриса: чем отличаются и что выбрать

Окраска гематоксилином и эозином (H&E) — основной метод гистологической диагностики уже более 150 лет. По данным Bancroft's Theory and Practice of Histological Techniques (8th ed., 2018), H&E применяется примерно в 95 % гистологических исследований мира.

Сам гематоксилин — это краситель из коры дерева Haematoxylum campechianum. Используется не сам по себе, а в виде окисленной формы — гематеина, в комплексе с протравой (mordant) — солью металла, обычно алюминия (KAl(SO₄)₂·12H₂O — алюмо-калиевые квасцы). Существуют десятки рецептур, но три классических — Майера, Эрлиха и Гарриса — встречаются почти в любой гистолаборатории.

Гематоксилин Майера

Создан Paul Mayer в 1903 году. Состав: гематоксилин + алюмо-калиевые квасцы + йодат натрия (как окислитель) + лимонная кислота + хлоралгидрат. Прогрессивный краситель — окрашивает ядра до желаемой интенсивности и останавливается, не требует дифференцировки кислым спиртом.

• Время окраски: 10-15 минут.
• Подготовка: не требуется — раствор готов к работе из бутылки.
• Когда применять: рутинная гистология, иммуногистохимия (первичная контрастная окраска перед DAB-визуализацией), большие потоки препаратов.
• Стабильность: до 12 месяцев в закрытой бутылке, до 1 месяца в кювете.

Гематоксилин Эрлиха

Создан Paul Ehrlich в 1886 году. Состав: гематоксилин + алюмо-калиевые квасцы + глицерин + этиловый спирт + ледяная уксусная кислота. Регрессивный краситель — переокрашивает ткань, после чего избыток снимается дифференцировкой 0,5-1 % HCl в 70 % этаноле.

• Время окраски: 5-15 минут + дифференцировка 5-30 секунд.
• Подготовка: требуется естественное «дозревание» 4-6 недель после смешивания (или искусственное окисление йодатом натрия).
• Когда применять: научно-исследовательская гистология, архивные препараты (даёт самое контрастное и устойчивое к выцветанию окрашивание), сложные ИГХ-протоколы.
• Стабильность: при правильном хранении — годы.

Гематоксилин Гарриса

Создан Henry F. Harris в 1900 году. Состав: гематоксилин + алюмо-калиевые квасцы + этанол + оксид ртути(II) (HgO) — современные модификации заменяют ртуть на йодат натрия из-за токсичности. Регрессивный, как Эрлиха, но окисляется быстрее и стабильнее.

• Время окраски: 1-5 минут + дифференцировка.
• Подготовка: готов к работе сразу после фильтрации.
• Когда применять: цитология (Pap-окраска), массовая гистология с быстрым потоком препаратов, гематологическая цитология (костный мозг, лимфоузлы).
• Стабильность: 6-12 месяцев.

Какой выбрать для вашей лаборатории

Решение зависит от трёх факторов:

1. Поток препаратов. Большой поток (> 500 препаратов/день) — Майера (быстро, без дифференцировки). Малый, исследовательский — Эрлиха (контраст важнее скорости).
2. Тип исследования. Рутинная диагностика — Майера. Цитология — Гарриса. Архив + ИГХ — Эрлиха.
3. Требования к токсичности. Современные требования EHS жёстко ограничивают ртуть. Гарриса с HgO в РФ и РБ заменён на безртутные модификации; в каталогах BioVitrum — оба варианта.

Типичные проблемы окраски

• Слабая окраска ядер — старый раствор (потерял окислительную способность), просроченная партия, неправильное pH (нужно 2,2-2,8 для алюминиевых гематоксилинов).
• Тёмный фон — недостаточная дифференцировка (Эрлиха/Гарриса) или контаминация раствора.
• Грубые гранулы — выпадение осадка из перенасыщенного раствора; раствор пора фильтровать или менять.
• Голубоватый оттенок ядер вместо синего — недостаточное «синее восполаскивание» (bluing) в литиевой воде или 0,3 % аммиаке.

ВИЕНА МЕДИКАЛ поставляет все три классических гематоксилина производства BioVitrum (Россия) — в каноничных и безртутных модификациях. Все позиции имеют РУ Минздрава РБ.